Guia per la presa de mostres

Analítica General

• Sang total
La mostra per a l'estudi hematològic és sang total. La sang total és una mostra fràgil pel que exposem uns petits suggeriments respecte a la presa de mostra.

- Extreure sang per punció venosa evitant si és possible, les extraccions de venes de petit calibre ja que les extraccions dificultoses i traumàtiques estimulen el mecanisme de la coagulació.
- Rebutjar l'agulla de la xeringa i traspassar la mostra al tub amb anticoagulant lliscant la sang per les parets del tub. Tapar i homogeneïtzar suaument movent el tub amb moviments giratoris per evitar l'hemòlisi. Almenys 10 moviments
- El anticoagulant d'elecció per al recompte de cèl lules sanguínies i la seva avaluació en mamífers és l'EDTA (tap vermell). La heparina no preserva tan bé les cèl lules.
- Omplir els tubs almenys fins a la meitat per evitar la hemodilució. El laboratori subministra el material d'acord amb el pes i la talla de l'animal, tubs d'1 o 5 ml de capacitat
- Reservar una resta de l'extracció per preparar dues o tres extensions fines de sang perifèrica. Assecar a l'aire i enviar juntament amb la mostra anterior. Si és possible sempre és convenient fixar el frotis de sang un cop sec en metanol.
- Protegir de rascades els frotis mitjançant unes caixes especialment dissenyades per a l'enviament de citologies o enfrontat els dos portes amb un cartronet o coixinet en ambdós extrems

• Coagulació
Plasma citacions
El plasma citratada s'obté a partir de la barreja de sang sencera amb citrat sòdic, en la proporció que indica el tub (1:9) de tap blau. S'homogeneïtza la dilució i es centrifuga immediatament, sempre abans dels 30 minuts de l'extracció a 2.500 o 3.000 rpm durant 12 - 15 min.

- Separar el plasma acuradament amb una pipeta o una xeringa nova, intentant no aspirar les cèl lules
- És convenient congelar el plasma previ a la tramesa al laboratori. Per això, hi ha uns contenidors especials per a l'enviament de mostres congelades que poden demanar a la delegació del Laboratori més proper
- Si l'extracció no va resultar fluida i fàcil, es recomana la repetició de la presa de mostra amb una nova xeringa, un nou tub i una vena diferent, per les raons prèviament esmentades

• Sèrum
En la majoria de les proves de laboratori que es realitzen en les Unitats de Bioquímica, Immunologia, Toxicologia i Immunoassaigs, la mostra requerida és sèrum. Sempre és recomanable prendre les mostres en dejú d'almenys 8 hores. La lipemia interfereix en gran quantitat de proves (veure taula).

- El sèrum s'obté per punció venosa i transferint la sang a una tub vidre, preferiblement o de plàstic, sense anticoagulant
- Deixar a temperatura ambient fins que el coàgul estigui ben format i separar el sobrenedant (sèrum), sino s'utilitzen tubs sèrumgel, introduint en un tub sense aditius, on s'enviarà la mostra al Laboratori.
- Refrigerar a +4 C º fins que s'enviï al laboratori
- Hi ha uns tubs que contenen una gelatina que permet la separació del coàgul del sèrum un cop centrifugada la mostra. Es recomana esperar que la sang estigui totalment coagulada (aproximadament 60 min.)

• Plasma Heparina / Plasma EDTA
Aquest tipus de mostra es requereix en algunes proves especials, com:

- Calci iònic (Plasma HEPARINA)
- ACTH (Plasma EDTA)
- Amoníac (Plasma EDTA)

S'utilitza un tub amb el anticoagulant específic segons la determinació. Un cop homogeneïtzada la mostra, es centrifuga i es separa el sobrenedant (plasma). Normalment el plasma obtingut ha de congelar ràpidament per la labilitat de les substàncies a analitza.

Estudi Microbiològic

• Orina
Les mostres d'orina per anàlisi bacteriològica han de ser preferentment preses per cistocentesis o per catèter. Les mostres preses per micció lliure seran interpretades amb precaució tenint en compte que poden estar contaminades de cèl lules i de microorganismes de les parts baixes del tracte urogenital i en qualsevol cas, sempre és convenient que siguin de la meitat de la micció, és a dir, rebutjant la primera part de l'orina i recollint només la resta.

• Femtes
Examen parasitològic

- La femta destinades a anàlisi parasitològic s'han de recollir del recte, llevat que s'observi l'animal en l'acte de la defecació
- Els excrements s'han de dipositar en un recipient net i / o en un recipient que subministra el laboratori que conté formalina per preservar protozous

Examen bacteriològic (coprocultiu)

- El sistema de recollida és el mateix que en el cas anterior però la mostra ha de ser dipositada en un recipient estèril
- Si a més de remetre el pot contenidor amb la femta s'envia un hisop rectal amb mitjà de transport Cary Blair s'ampliarà la sensibilitat del cultiu (preserva els microorganismes anaerobis, Camppylobacter sp)

• Mostres anaeròbies
Un factor crucial per l'èxit dels cultius anaeròbics és el transport de les mostres clíniques, el efecte letal de l'oxigen atmosfèric ha de ser anul.lat fins que pugui ser processat.

Mostres apropiades per cultiu anaerobi:

- Pus o secrecions procedents de ferides profundes o quirúrgiques
- Abscés
- Teixits obtinguts després de cirurgia o per necròpsia
- Líquids corporals: aspirats pleurals o peritoneals
- Líquids articulars o líquid cefaloraquidi

Mostres no apropiades per a cultiu anaerobi:

- Aspirador traqueals i broncoaspiracions
- Hisops de mucoses
- El material líquid per a cultiu anaerobi s'obté preferentment amb ajuda d'una xeringa i agulla estèrils, expulsant tot l'aire contingut en elles
- En cas de lesions o ferides cutànies, sempre que sigui possible, s'ha d'aspirar el pus present sota d'un penjoll de pell o en cavitats profundes mitjançant una agulla i xeringa. Si això no és possible, utilitzar un hisop però tenint cura de prendre la mostra de les àrees més profundes i evitant tocar les àrees cutànies adjacents
- Teixits procedents de necròpsies o de cirurgia (uns 2 cm de diàmetre) normalment conserven un ambient anaerobi al centre de la peça, de manera que poden introduir-se i remetre al laboratori en un contenidor estèril
- Aquest tipus de mostres no es refrigeren, ja l'absorció d'oxigen és major a menor temperatura. Conservar per tant a temperatura ambient

• Exudats i secrecions

- Prendre la mostra en un hisop estèril i remetre al laboratori refrigerats amb mitjà de transport Stuart o Amies perquè la mostra no es dessequi
- El tipus de mostra serà la procedent d'obertures naturals o de superfície corporal, per exemple:
- Exsudat ocular: obtenir la mostra abans d'administrar analgèsics locals, coliris o antibiòtics. Per a la recerca de Chlamydia sp Evert la parpella i fregar la conjuntiva amb un hisop
- Secreció mamària: Igual que l'orina recollida per micció lliure, rebutjar les primeres gotes, probablement contaminades per la flora regional de la pell i prendre la mostra de la meitat de la secreció làctia
- Exsudat faringi: tocar amb la turunda qualsevol zona amb exsudat, membranes o inflamació intentant evitar el contacte amb la mucosa oral o llengua
- Nasal. Introduint l'hisop el més profund possible. Si es realitza biòpsia de massa intranasal enviar una porció per microbiologia
- Exsudat òtic, etc.

• Rentats traqueals o Broncoalveolares
Enviar el material aspirat en un contenidor estèril millor que amb un hisopo. Lo ideal és realitzar citologia i microbiologia al mateix temps.

• Hemocultius
El cultiu de sang es realitza quan es sospita de bacteremia o septicèmia. Es requereix una asepsis estricta ja que una petita contaminació pot produir un resultat erroni. Presa de mostra Abans de procedir a la presa de sang, el lloc de la punció ha de ser afaitat i netejat amb sabó. Desinfectar amb alcohol etílic al 70% i posteriorment aplicar solució iodada. Deixar assecar durant un minut perquè pugui exercir la seva acció. No s'aconsella l'extracció de la sang a través de catèters ja que aquests dispositius poden albergar bacteris que els han colonitzat donant lloc a falsos positius.
Inoculació de les ampolles:

- Retirar la cobertura més externa de les ampolles (no descargolar el tap)
- Desinfectar el tap de goma amb solució iodada i deixar-lo assecar almenys un minut.
- Inocular l'ampolla amb la quantitat de sang recomanada i moure els flascons perquè la sang i el medi es barregin
- No introduir els flascons a la nevera

Volum de sang:
Dependrà de la talla de l'animal. Consultar amb el laboratori per rebre les ampolles apropiades segons la talla de l'animal i el volum de sang a extreure.

• Líquids Corporals: Pleural, ascític, Articular, LCR.
Mantenir les màximes mesures d'asèpsia i enviar al laboratori en un tub estèril. Sempre serà una mostra més representativa que en un hisop.

• Cultiu Micològic
Les lesions de pell per a estudi microbiològic: cultiu de fongs i observació directa s'han de treure de les vores de la lesió i contenir tant pèls com escates de pell.

Estudi de Líquids i Citologies.

• Citologies

- Les mostres citològiques poden obtenir-se mitjançant un hisop, per raspat o per aspiració mitjançant una agulla fina
- Si s'obtenen amb un hisop, rodar l'hisop sobre un portaobjectes net i sec, mai arastrar
- Si es realitza mitjançant un raspat, es requereix una fulla de bisturí que es passarà sobre la zona de la lesió cap amunt diverses vegades. El material obtingut sobre el full de bisturí s'ha de dipositar sobre el portaobjectes
- Les mostres obtingudes per punció s'expulsen a l'extrem del portaobjectes.
- Es pren un altre portaobjectes net i es col.loca sobre el seu costat més estret sobre del material extret a 45 †. Realitzar una extensió del material cap endavant al llarg del portaobjectes fins que la capa de cèl lules es torna més fina i s'esgota el material
- Deixar assecar la extensió durant 20 o 30 min
- L'enviament dels portaobjectes es realitza preferiblement en contenidors especialment dissenyats per a això (plàstic dur). Hi ha un altre tipus de transports però si no van convenientment protegits existeix un major risc de trencament

• Líquids o efusions
Tipus d'anàlisi que es realitzen en un líquid:

- Recompte de cèl lules, enviar preferiblement en un tub amb EDTA
- Citologia; serveix la mostra anterior
- Microbiologia: segons el citat anteriorment

• Medul la Òssia
Hi ha diverses formes de preparar les extensions de moll d'os encara que nosaltres recomanem la tècnica combinada: una part per aixafament i una altra per extensión.Para realitzar un estudi complet preguem enviïn sang sencera amb EDTA i si és possible extensions de sang fresca (veure preparació de frotis sanguini ). Si no fos possible enviar mostra de sang perifèrica, preguem ens remetin els resultats hematològics obtinguts previs a l'extracció de moll d'os.

• Mostres Procedents de Necròpsies
En algunes ocasions per realitzar un examen complet post-mortem cal complementar histopatologia i microbiología.Dado que el tractament de les mostres és diferent, a continuació mostrem algunes indicacions en el procés d'obtenció de les mostres.

- Selecció de les mostres. El clínic realitza la necròpsia enviant al laboratori els òrgans que consideri més adequats segons lesions macroscòpiques i quadre clínic
- Les mostres obtingudes per a examen bacteriològic han de ser el més asèptiques possibles. Les peces dels diferents òrgans s'introduiran en envasos estèrils, separats i correctament identificats
- Per a l'examen anatomopatològic es poden enviar els diferents òrgans en el mateix envàs
- Mida de les peces. Es recomana que no siguin peces molt grans ja que és més fàcil que es produeixi una incorrecta refrigeració i pel que fa a fa a l'estudi histopatològic, el formol no penetra profundament en les porcions centrals
- La mida de les peces per tant no ha de superar els 2 cm de diàmetre. Si són peces majors fer diverses porcions del teixit a estudiar